ПЦР на цитомегаловирус в крови и по мазку

Цитомегаловирус или CMV — распространенный вирус из семейства герпесвирусов. Один из эффективных методов его обнаружения — полимеразная цепная реакция или ПЦР. Диагностика вируса производится высокоточной техникой, работающей на молекулярно-генетическом уровне. ЦМВ выявляется в хронической/острой фазе или латентной стадии (когда заболевание себя еще не проявило). ПЦР иногда является единственным тестом определения инфекции, когда остальные техники не работают.

Описание метода

ПЦР относится к одним из точнейших методов обнаружения CMV-вируса. Достоверные данные получают из взятого у пациента биологического материала, в котором выявляется и исследуется геном возбудителя, т. е. участок ДНК вируса. Количественное и качественное определение вируса заключается в многократном удвоении (амплификации) части молекулы с ДНК посредством воздействия ферментов с получением точной копии отобранного биологического материала пациента.

Осуществляется это в лаборатории на специальном реакторе. Реакция размножения проходит в несколько стадий, поэтому называется цепной. Полученный материал позволяет визуально исследовать пробу, сравнить с эталоном в базе данных, установить диагноз, на основании которого производится подбор схемы лечения.

Преимущества и недостатки метода

ПЦР-диагностика наделена массой плюсов, главные из которых:

1. Возможность проведения теста с большим набором биологического материала:
   1. соскоб из мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища;
   2. моча, слюна, спинномозговая жидкость.
2. Время от забора материала до получения результатов исследования не превышает 2-х суток.
3. Высокая чувствительность метода ПЦР, что позволяет обнаружить возбудителя в отрезке ДНК CMV. Благодаря этому преимуществу, болезнь выявляется на ранних стадиях в латентной или персистирующей форме инфекции.
4. Точность метода при исследовании любой человеческой жидкости и мазков составляет 90—95%. Но вирус может присутствовать в разных тканях, не только в исследуемых.
5. Погрешность исследования не превышает 3—5%.

Несмотря на высокую эффективность и точность, у метода есть недостатки:

1. Невысокая специфичность и низкая прогностическая ценность. ПЦР не позволяет отличить латентную фазу жизнедеятельности вируса от активной стадии заболевания.
2. Невозможность дифференциации первичной инфекции ЦМВ от повторной реактивации хронической формы.
3. Сложности с оценкой давности заражения, степени патогенности и агрессивности, присущей цитомегаловирусу.
4. Отсутствие возможности прогнозирования развития болезни.
5. Потребность использования дополнительных методов диагностики, например, ИФА (для уточнения данных).

Материалы для исследования

При ПЦР-диагностике на ЦМВ исследуются разные жидкости человеческого тела, поэтому может потребоваться сдать:

• посев изо рта;
• кровь;
• мочу;
• мазок изо рта (мокроту);
• соскоб из уретры или влагалища;
• спинномозговую жидкость;
• грудное молоко.

Подготовка и правила сдачи анализа

Точность и достоверность результатов ПЦР-теста определяется:

• качеством реактивов;
• степенью квалификации и внимательностью сотрудников лабораторий;
• соблюдением необходимых правил подготовки пациента.

Основные требования при прохождении тестов на ЦМВ методом ПЦР:

1. Перед исследованием нужно отменить прием антибиотиков и антибактериальных средств за 2 дня до предполагаемой сдачи биоматериала. Отмена остальных лекарств согласовывается с лечащим врачом.
2. Накануне сдачи крови для ПЦР нельзя курить минимум 60 минут.
3. Не употреблять алкоголь, не есть жирной пищи за 2 дня до исследования.
4. Перед сдачей биоматериала для ПЦР не рекомендуется проходить рентгенографию, ректальные осмотры, ряд физиотерапевтических процедур. Они могут повлиять на результат, вызвав изменения в цитомегаловирусе.
5. Сдача крови происходит в утренние часы и натощак. Допускается сдача в вечернее время, но после голодания в течение 6 часов.
6. Соскоб из влагалища, цервикального канала сдается при следующих условиях:
   1. за сутки не спринцеваться, не вводить медпрепаратов;
   2. за 3-е суток необходимо избегать половых контактов;
   3. при сдаче анализа перед зачатием соскоб берется на 5-й день от начала или до 5-го дня до планируемого завершения менструации;
   4. соскоб из уретры проводится не ранее 2-х часов с момента последнего мочеиспускания.
7. Жидкость из мочевого пузыря собирается дома (утром и натощак), и сдается в лабораторию не позже 3-х часов после сбора.
8. Анализ слюны проводится следующим образом: перед сдачей мазка требуется не есть, не чистить зубы. Эти манипуляции могут вызвать изменения в слюне, что приведет к ложным результатам.

Сроки готовности ПЦР-анализа

Результат будет готов в течение 2-х суток с момента сдачи биоматериала. Иногда результат готов в первый день.

Интерпретация результатов

Положительный ответ выявляется по следующим данным:

• в образце биоматериала обнаружили фрагменты ДНК с цитомегаловирусом, что говорит об инфицировании вирусом;
• в пробе присутствует мочевина, что свидетельствует о нарушении правил сдачи биоматериала и получении ложноположительного ответа.

Отрицательный ответ выявляется по следующим данным:

• в пробе не обнаружен фрагмент ДНК, характерный для цитомегаловируса;
• в биоматериале не присутствует достаточного количества эпителиальных клеток для обнаружения вируса из-за нарушения правил забора пробы на анализ.
  Результаты могут выдаваться в процентах.

При сдаче крови и другой жидкости проводится определение уровня антител:

• IgM для оценки первичного заражения вирусом или дифференциации обостренной хронической стадии инфекции, что могло произойти за последние 2—4 месяца;
• IgG для выявления инфекции, но без определения момента заражения и активности вируса.

Если у взрослого с хорошей иммунной системой в мазке, моче или соскобе выявлено наличие ЦМВ, специфическое лечение не нужно.

Следовательно, присутствие антител к вирусу и получение положительных результатов ПЦР-диагностики или посева на ЦМВ при отсутствии клинической картины заболевания не являются поводом лечить инфекцию противовирусной терапией.